Doctoral thesis (Dissertations and theses)
XYLANFACTORY - Optimisation de la culture d'une bactérie thermophile en bioréacteurs pour la production d'hémicellulases et la valorisation des xylanes des biomasses lignocellulosiques
Bouchat, Romain
2022
 

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Keywords :
biomasse lignocellulosique; xylanase; Thermobacillus xylanilyticus; diversité phénotypique; sous-population; bioréacteur; ségrégostat
Abstract :
[fr] Le fractionnement pour la valorisation des hémicelluloses de la biomasse lignocellulosique est une étape clé du bioraffinage du végétal. L’utilisation d’enzymes lignocellulolytiques est une des voies utilisées pour l’hydrolyse des biomasses car elle est éco-responsable. Il est nécessaire de disposer d’enzymes efficaces et d’optimiser leur production. Cette thèse a pour objectif d’améliorer la production d’hémicellulases par une bactérie thermophile, Thermobacillus xylanilyticus. Cette bactérie hémicellulolytique sécrète une enzyme de la famille GH11 avec une forte activité xylanase mais cette activité a tendance à baisser au cours des cultures. La thèse s’est focalisée sur l’étude des facteurs populationnels impactant la chute de l’activité lors de cultures successives. Une dérive phénotypique menant à la présence d’une sous-population tricheuse a été identifiée comme responsable de la perte d’activité. Des stratégies de contrôle de la diversification phénotypique ont alors été établies. Elles ont été basées sur l’introduction de changements environnementaux (sources de carbone) ou en changeant l’état physiologique des cellules (âge des inocula) lors de cultures successives pour améliorer la production d’enzymes. A partir de ces approches, l’activité xylanase a pu être augmentée jusqu’à 15-fois en alternant la source de carbone. Les activités complémentaires β-xylosidase et acétyle estérase ont été augmentées en changeant l’âge de l’inocula (cellules en phase stationnaire). Dans la dernière partie de la thèse, la stratégie des changements environnementaux a été faite avec des cultures en ségrégostat ce qui a permis de contrôler la diversification phénotypique de la souche en bioréacteurs.
[en] Fractionation for valorization of hemicelluloses from lignocellulosic biomass is a key step in the biorefinery of plants. The use of lignocellulolytic enzymes is one of the ways used for the hydrolysis of biomasses because it is more eco-responsible. It is then necessary to have efficient enzymes and to optimize their production. This thesis aims to improve the production of hemicellulases by a thermophilic bacterium, Thermobacillus xylanilyticus. This hemicellulolytic bacterium secretes an enzyme of the GH11 family with a strong xylanase activity but this activity tends to decrease during the cultivations. The thesis focused on the study of population factors impacting the fall of the activity during successive cultivations. A phenotypic diversification leading to the presence of a cheating subpopulation was identified as responsible for the loss of activity. Strategies to control phenotypic diversification were then established. They were based on the introduction of environmental changes (carbon sources) or by changing the physiological state of the cells (age of inocula) during successive cultivations to improve enzyme production. From these approaches, xylanase activity could be increased up to 15-fold by alternating the carbon source. The complementary activities β-xylosidase and acetyl esterase were increased by changing the age of the inocula (cells in stationary phase). In the last part of the thesis, the strategy of environmental changes was done with segregated cultures which allowed to control the phenotypic diversification of the strain in bioreactors.
Disciplines :
Microbiology
Author, co-author :
Bouchat, Romain ;  Université de Liège - ULiège > TERRA Research Centre
Language :
French
Title :
XYLANFACTORY - Optimisation de la culture d'une bactérie thermophile en bioréacteurs pour la production d'hémicellulases et la valorisation des xylanes des biomasses lignocellulosiques
Defense date :
20 September 2022
Number of pages :
256
Institution :
ULiège - Université de Liège [Gembloux Agro-Bio Tech], Gembloux, Belgium
Université de Reims Champagne-Ardenne, Reims, France
Degree :
Docteur de l'Université de Liège en Microbiologie/Biotechnologie
Cotutelle degree :
DOCTEUR DE L’UNIVERSITÉ DE REIMS CHAMPAGNE-ARDENNE EN SCIENCES AGRONOMIQUES, BIOTECHNOLOGIES AGRO‐ALIMENTAIRES (Spécialité : Microbiologie)
Promotor :
Delvigne, Frank  ;  Université de Liège - ULiège > TERRA Research Centre > Microbial technologies
Rémond, Caroline;  Université de Reims Champagne-Ardenne
President :
Jacques, Philippe ;  Université de Liège - ULiège > TERRA Research Centre
Jury member :
Rakotoarivonina, Harivony;  Université de Reims Champagne-Ardenne
Phalip, Vincent;  ULille - Université de Lille [FR]
Alfenore, Sandrine;  INSA Toulouse
Ben Chaabane, Fadhel;  Institut français du pétrole et des énergies
Name of the research project :
XylanFactory
Available on ORBi :
since 15 September 2022

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