Contribution à l’étude protéomique de l’interaction plante/puceron et recherche d’éliciteurs de mécanismes de défense végétale dans la salive de Myzus persicae.

La salive des insectes joue un rôle important dans la mise en place des mécanismes de
défense chez les plantes et encore peu d’études se sont intéressées à l’identification
d’éliciteurs dans la salive de pucerons.
Pour cette étude, trois volets sont investigués. Premièrement, une approche
protéomique a été développée afin d’analyser les protéines exprimées différentiellement suite
à différentes périodes d’infestation de Myzus persicae chez Arabidopsis thaliana. Nous avons
également effectué des mesures de pH et de burst oxydatif sur une suspension cellulaire de
tabac afin de démontrer le pouvoir éliciteur de la salive. Une approche génomique a
également été développée afin de cloner un gène codant pour une glucose oxydase (GOX). En
effet, cet éliciteur, connu notamment chez les Lépidoptères, a été identifié dans la salive de M.
persicae. Le but est donc de démontrer l’activité élicitrice de la protéine recombinante.
A l’issue de ce travail, nous avons observé une expression protéique différentielle chez
A. thaliana suite à l’infestation de M. persicae. L’identification des protéines n’ayant pas
encore été réalisée, nous ne connaissons pas encore la nature de ces protéines induites.
Nous avons également remarqué que l’ajout de diète contenant de la salive de puceron
pouvait provoquer, chez les cellules de tabac, une modification de pH similaire à celle
observée avec la surfactine, éliciteur de référence. Cependant la réponse est peut-être la
conséquence d’un effet tampon dû au pH basique de la diète.
Enfin, nous avons réalisé le clonage d’un gène codant pour une GOX mais
l’expression de la protéine d’intérêt dans E. coli est faible. Les protocoles d’expression et de
purification de la protéine recombinante doivent être optimisés, de manière à pouvoir
procéder à des tests (mesure de pH, burst oxydatif) sur cellules de tabac.