Identification de protéines interagissant avec les facteurs de transcription AP-2 et contribuant à la surexpression du gène ERBB2 dans le cancer du sein.

Le cancer du sein est le cancer le plus fréquent chez la femme (Boyle and Ferlay, 2005; Ferlay et al., 2007). Même si les traitements sont de plus en plus efficaces, il est responsable d’environ 130 000 décès en Europe. Environ 20-30% des cancers du sein surexprime le gène ERBB2. Cette surexpression confère à la cellule un profil tumoral très agressif, et résistant aux chimiothérapies conventionnelles. L’étude des facteurs responsable de la surexpression du gène ERBB2 dans les cancers du sein est le thème principal de recherche du laboratoire d’oncologie moléculaire. Notre laboratoire, a étudié les mécanismes moléculaires responsables de la surexpression du gène ERBB2 dans les cancers du sein. Nous avons montré que la surexpression est la conséquence d’une stimulation de la transcription et non de la stabilisation de l’ARN (Pasleau et al., 1993).Pour étudier la régulation de la transcription un fragment de 6 kb du promoteur du gène ERBB2 a été cloné et séquencé. Différentes régions régulatrices ont été identifiées (Grooteclaes et al., 1994). Plusieurs sites de liaison pour des facteurs AP-2 ont été identifiés (Delacroix et al., 2005; Grooteclaes et al., 1999; Vernimmen et al., 2003a). La fixation des facteurs au promoteur a été vérifiée par Chromatin Immuniprecipitation (ChIP assay) (Begon et al., 2005; Delacroix et al., 2005).Afin de mieux comprendre le fonctionnement des facteurs de transcription AP-2, nous avons cherché les protéines interagissant avec ce facteur et contribuant à la surexpression d’ERBB2 dans des lignées de cancer du sein. Précédemment, Dominique Begon a montré l’interaction de la protéine YY1 avec le facteur de transcription AP-2alpha et leur implication sur le promoteur du gène ERBB2 (Begon et al., 2005). La première partie de mon travail a été de mettre en corrélation par immunohistochimie l’expression des protéines YY1 et AP-2alpha avec la surexpression d’ERBB2 dans des tumeurs primaires. Nous avons également voulu étudier l’effet d’une diminution des protéines YY1 et AP-2 sur l’expression d’ERBB2, à l’aide de siRNAs (Voir article 1 en annexe, (Allouche A and Nolens G. et al., 2008). La deuxième partie de ce travail a porté sur l’identification d’autres protéines pouvant interagir avec les protéines AP-2. Après purification, les protéines Ku70 et Ku80 furent identifiées. Nous avons voulu étudier l’effet de cette interaction sur l’activité des protéines AP-2 (alpha et gamma;) et sur l’expression d’ERBB2 (voir article 2 en annexe).