Modulation de l'activation du facteur de transcription NF-kB par un inhibiteur d'histone désacétylases

L'ajout simultané d'inhibiteurs des histones déacétylases (HDAC) au TNFalpha prolonge l'induction du facteur de transcription NF-kB en stabilisant l'activation du complexe IKK. Au cours de ce travail, l'effet de la Trichostatin A (TSA), un inhibiteur de HDACs à large spectre d’action, sur les différentes voies d'activation du NF-kB a été étudié. L'effet de l’addition simultanée de la TSA aux inducteurs de la voie classique (TNFalpha, PMA), de la voie alternative (Lymphotoxine beta;) et des voies alternatives (H2O2 et Pervanadate de Sodium) a été analysé. Le pervanadate de sodium (PV) est agent insulino-mimétique qui inhibe les tyrosines phosphatases et mime un stress oxydant. Ces études comparatives ont montré un prolongement de l'activité du NF-kB si la TSA est ajoutée simultanément au TNFalpha, PMA et au PV ; pas si elle est ajoutée à l'H2O2 ou à des agents induisant la voie alternative. Les mécanismes moléculaires sous-jacents aux prolongements de l'activation élicitée par le TNFalpha et le PV ont été étudiés en détails. Deux processus différents sont impliqués. La TSA ajoutée aux inducteurs de la voie classique prolonge l'activité du complexe IKK alors qu'ajoutée au PV elle induit un retard de synthèse important du mRNA de l'inhibiteur IkBalpha. De nombreuses expériences d'immuno-précipitation de la chromatine ont montré que l'ajout de la TSA au PV diminue (i) le recrutement de l'ARN polymérase II, (ii) l'acétylation et la phosphorylation de l'histone H3 sur la Lys14 et la Ser 10 respectivement, (iii) la phosphorylation sur la Ser 536 de p65 et (iv) le recrutement d'IKKalpha. Il est important de savoir qu'aucune de ces différences ne s'observent au niveau du promoteur d'Icam-1, un autre gène dépendant du NF-kB. Ces observations ont donc montré que l'effet de la TSA sur l'activation du NF-kB dépend non seulement du type de stimuli mais aussi du promoteur. Ce travail met en évidence un rôle inhibiteur des HDAC dans l'activation du NF-kB qui varie en fonction des stimuli.