Exploration des propriétés d’une protéine dont le gène est muté dans certaines familles atteintes d’épilepsie myoclonique juvénile (EMJ) : EFHC1 ou myoclonine 1.

EFHC1 est une nouvelle protéine qui s’avère mutée dans certaines familles atteintes d’EMJ. A ce jour, l’étude des mutations associées à différents types d’épilepsie a souvent débouché sur l’identification de mutations au niveau de gènes codant des canaux ioniques. Cependant, dans ce cas, les résultats sont beaucoup plus inattendus ; la protéine impliquée n’étant pas un canal ionique mais une protéine à domaine EF-hand. L’objectif principal du présent travail est de mieux appréhender les propriétés biochimiques et fonctionnelles d’EFHC1. Une telle démarche nécessite notamment d’identifier les tissus et les cellules qui expriment la protéine, de déterminer la localisation cellulaire et enfin d’identifier les partenaires protéiques.Dans la première partie de ce travail, après avoir observé la localisation d’EFHC1 au niveau de l’appareil mitotique et du centrosome dans différentes lignées cellulaires, nous nous sommes intéressés à l’étude de l’expression et de la localisation de l’ARN messager et de la protéine EFHC1 dans les cerveaux de souris adulte et embryonnaire (au 16ème jour embryonnaire).La seconde partie de ce travail consiste en l’identification des partenaires protéiques potentiels d’EFHC1 grâce à des expériences d’immunoprécipitation. Les différentes protéines testées étant choisies sur bases de nos résultats antérieurs ainsi que sur les données disponibles dans la littérature.Dans la troisième partie de ce travail, nous nous sommes intéressés à l’étude de la localisation dans des cellules HEK-293 de quatre protéines à domaines DM10 homologues à EFHC1, à savoir EFHC2 humaine, Rib72 de Chlamydomonas reinhardtii, Defhc1 et Defhc2 de Drosophila melanogaster. Chaque chapitre fera l’objet d’un rappel systématique du contexte scientifique qui a précédé notre démarche expérimentale, des objectifs poursuivis, des résultats obtenus et de leurs discussions. Nous rassemblerons ensuite ces résultats dans le cadre d’une conclusion.