Estructura y composición polipeptídica atípicas de los complejos respiratorios de Euglena gracilis

Euglena gracilis, un alga secundaria no parásita relacionada con los tripanosomas, tiene un sistema de fosforilación oxidativa mitocondrial complejo constituido por enzimas respiratorias atípicas. Recientemente, el análisis bioinformático y mediante 2D BN/SDS PAGE de la composición de subunidades de estos complejos respiratorios mostró que al menos 41 de las subunidades no canónicas reportadas en tripanosomas están también presentes en esta alga, así como 48 subunidades clásicas descritas en otros eucariotes. En el presente trabajo, los complejos I, III, IV y V fueron purificados a partir de mitocondrias aisladas mediante cromatografía líquida después de ser solubilizados con n-dodecil-maltósido. Utilizando los complejos purificados se realizó un análisis 3D BN/SDS/SDS PAGE y posterior espectrometría de masas, mediante esta estrategia se resolvieron e identificaron las subunidades que los componen, lo que confirmó la composición polipeptídica atípica de los complejos respiratorios de esta alga. La masa molecular aparente de los complejos purificados I y V (1.5 y 2.2 MDa, respectivamente) se encuentra muy por encima de los complejos clásicos. Por su parte, el análisis de partícula única a partir de imágenes de microscopía electrónica de transmisión reveló algunas características estructurales inusuales en el complejo V, estas incluyen ángulos menores entre los monómeros y algunas extensiones adicionales de la región membranal, mientras que el complejo I mostró también una extensión en el brazo extramembranal.