Etude de la reconstitution immunitaire après greffe de cellules souches hématopoïétiques : focus sur la fonction thymique et les lymphocytes T régulateurs

L’allogre e de cellules souches hématopoïétiques, après conditionnement myéloalbatif
ou non, est devenue une option de choix dans le traitement des maladies hématologiques
malignes ou génétiques. Malheureusement le succès de ce traitement se trouve trop souvent
entaché par des complications majeures telles que les infections ou la maladie du greffon
contre l’hôte (GVHD), dans laquelle les cellules du donneur attaquent l’organisme du
receveur. La reconstitution d’un système immunitaire fonctionnel, notamment via le thymus,
est une étape clef dans la résolution de ces deux complications et l’utilisation de lymphocytes
T régulateurs semble très prometteuse dans la lutte contre la GVHD. Le présent travail vise
donc à étudier la reconstitution du système immunitaire après allogreffe sous trois angles
différents, en nous focalisant sur la fonction thymique et l’influence des lymphocytes T
régulateurs (Treg).
Dans la première partie, nous évaluons la reconstitution immunitaire à long terme
après greffe non-myéloablative et montrons que la néo-génération de lymphocytes T par le
thymus s’effectue à partir du jour 100 chez les patients de moins de 60 ans alors qu’au delà
de cet âge, elle est quasiment absente. Nous établissons également que la GVHD chronique
(cGVHD) sévère possède des effets extrêmement délétères sur le thymus.
Étant donné l’impact de la cGVHD sur le thymus et la reconstitution immunitaire,
nous avons voulu comparer l’impact, sur ces deux paramètres, d’un conditionnement nonmyéloalbatif censé réduire la GVHD et composé d’une irradiation lymphoïde totale et
d’anticorps anti-thymocytes (TLI-ATG) par rapport au conditionnement classique consistant
en une irradiation corporelle totale associée à de la fludarabine (TBI-Flu). Il ressort de
cette étude que, bien que réduisant de manière significative l’incidence de cGVHD, le
conditionnement TLI-ATG altère fortement la reconstitution du système immunitaire et
impacte négativement le taux de rechute/progression chez les patients traités.
Enfin, toujours dans le but de réduire le taux de GVHD post-greffe, nous avons choisi
d’examiner l’impact des Treg comme traitement de la xGVHD. Dans ce but, nous montrons
qu’une sélection de Treg humains, sur CliniMACS par déplétion CD8/19 et sélection
CD25, fournit une population de cellules enrichies en Treg capable de retarder de manière
statistiquement significative l’apparition d’une GVHD xénogénique induite par injection de
PBMC humains (autologues aux Treg) dans un modèle pré-clinique chez la souris NSG. De
plus, lorsque injectée sans les PBMC, cette population enrichie n’induit pas par elle-même
de GHVD.