Paper published in a book (Scientific congresses and symposiums)
Investigation of pregnancy-associated glycoproteins (PAGs) by means of an enzymoimunoassay (ELISA) sandwich kit for pregnancy monitoring in sheep
El Amiri, Bouchra; Delahaut, Philippe; Colemans, Yves et al.
2014In Chentouf, M; López-Francos, A; Bengoumi, M et al. (Eds.) Options méditerranéennes : Series A
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Keywords :
ELISA; Sandwich; PAGs; Moroccan sheep; Pregnancy diagnosis; ELISA-Sandwich; Ovin Maroc; Diagnostic de gestation
Abstract :
[en] The aim of the present study was to investigate the use of a PAGs ELISA-Sandwich kit (Ret. code E.G.7. CER. Marloie, Belgium) for both early pregnancy diagnosis (in Sardi sheep) and the pregnancy follow up (in Boujaâd and Boujaâd x D'man sheep). ln Sardi breed, plasma samples were obtained from pregnant ewes (n = 17) from day 18 to 30 of gestation at 2 days interval. ln Boujaâd (n = 8) and Boujaâd x D'man (n = 20) the blood samples were weekly collected from the first week of gestation till the 4th week after lambing. The PAG concentrations were determined by a sandwich-ELISA based on purified bovine PAG (boPAG-67 kDa) as a standard, the antiserum raised against caprine PAG (caPAG-55+62 kDa) as a capture antibody (1/40000) and antiserum raised against purified PAG from buffalo (AS 859) as detection antibody (1/32 000). The Avidin-HRP and TMB were used to reveal reactions. Ewes were assumed to be pregnant when PAG concentrations were higher than 0.8 ng/ml. Results showed that in Sardi sheep it is possible to detect ail ewes as pregnant as early as on 24 days of gestation. ln Boujaâd and Boujaâd x D'man the PAG concentrations reached the higher values just before lambing. This value is higher in ewes carrying more than one lamb than in those carrying a single lamb. To conclude, the present study shows that the ELISA kit used for early pregnancy diagnosis in sheep as weil as for pregnancy fellow up could be a good alternative to the radioimmunoassay RIA in countries where this last technique is hard to set up.
[fr] L'objectif du présent travail a été d'étudier l'utilisation d'un kit ELISA sandwich (Réf EG7 Code. CER. Mar/oie, Belgique) pour le diagnostic précoce de la gestation (chez la brebis Sardi) et le suivi de la gestation (chez la brebis Boujaâd et Boujaâd x D'man). Chez la race Sardi, des échantillons de plasma ont été obtenus à partir de brebis gestantes (n = 17) du 18iéme au 30ième jour de gestation à 2 jours d'intervalle. Chez les brebis Boujaâd (n = 8) et Boujaâd x D'man (n = 20) des échantillons de sang ont été collectés une fois par semaine à partir de la premiére semaine de gestation jusqu'à la 4ième semaine après agnelage. Les concentrations de PAG>lJnt été déterminées par ELISA Sandwich basé sur une PAG bovine (boPAG-67 kDa) comme standard un antisérum dirigé contre la PAG caprine (caPAG55- 62 kDa) comme anticorps de capture (1/40 000) et un antisérum dirigé contre les PAGs de buffle (As 859) comme anticorps de détection (1/32 000). L'avidine-HRP et le. TMB ont été utilisés pour la révélation des réactions. Les brebis ont été considérées gestantes lorsque les concentrations de PAG étaient supérieures à 0,8 ng / ml. Les résultats ont montré que chez la brebis Sardi, il est possible de détecter toutes les brebis gestantes dés le 24ième jour. Chez les brebis Boujaâd et le Boujaâd x D'man, les concentrations en PAG atteignent les valeurs les plus élevées juste avant l'agnelage. Ces valeurs sont plus élevées chez les brebis à portée double que chez celles à portée simple. En conclusion, la présente étude montre que le kit ELiSA-PAG utilisé pour le diagnostic de gestation précoce ainsi que pour le suivi des gestations pourrait être une bonne alternative au dosage radioimmunologique dans des pays où l'utilisation de cette technique est difficile.
Disciplines :
Veterinary medicine & animal health
Author, co-author :
El Amiri, Bouchra;  Institut Scientifique de Recherche Agronomique - INRA > Centre Régional de la Recherche Agronomique de Settat, Maroc
Delahaut, Philippe;  Centre d'Economie Rurale (Marloie) - CER, Belgique
Colemans, Yves;  Centre d'Economie Rurale (Marloie) - CER, Belgique
Melo de Sousa, Noelita ;  Université de Liège - ULiège > Département de sciences fonctionnelles (DSF) > Physiologie de la reproduction
Beckers, Jean-François  ;  Université de Liège - ULiège > Département de sciences fonctionnelles (DSF) > Physiologie de la reproduction
Language :
English
Title :
Investigation of pregnancy-associated glycoproteins (PAGs) by means of an enzymoimunoassay (ELISA) sandwich kit for pregnancy monitoring in sheep
Publication date :
2014
Event name :
Series A: Mediterranean Seminars 2014 number 108
Event date :
2014
Audience :
International
Main work title :
Options méditerranéennes : Series A
Editor :
Chentouf, M
López-Francos, A
Bengoumi, M
Gabiña, D
ISBN/EAN :
2-85352-525-2
Pages :
299-303
Peer reviewed :
Peer reviewed
Available on ORBi :
since 12 June 2014

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