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Faisabilité de la PCR dans la détection du développement de Toxoplasma gondii en culture cellulaire MRC5.
Chetaille, Eric; Hayette, Marie-Pierre; Puy, H. et al.
1994Congrès de la société française de parasitologie
 

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Keywords :
Toxoplasma; MRC5; in vitro cultures; PCR; Detection
Abstract :
[fr] OBJECTIF Etudier la faisabilité de la technique PCR pour la détection du développement de Toxoplasma gondii sur milieu cellulaire à partir des culots et des surnageants de cultures sur fibroblastes humains MRCS. METHODES Les surnageants de culture et les cellules correspondant à différents inoculums sont prélevés après un délai variant de 24 à 120h. La technique PCR utilisée comporte une extraction à l'iodure de sodium, l'amplification d'une séquence anonyme TGRI E spécifique de T.gondii (191 paires de bases) et une révélation après électrophorèse sur gel d'agarose-bromure d'éthidium en· UV. La positivité des cultures est controlée parallèlement par immunofluorescence à l'aide d'un anticorps monoclonal antiP30 (Sanofi Pasteur) réalisée sur les culots cellulaires des mêmes cultures. RESULTATS La positivité et la cohérence des résultats erl PCR (positivité de tous les inoculums > plus faible inoculum donnant un résultat positif), aussi bien à partir des culots cellulaires que des surnageants, démontrent la faisabilité de la méthode avec en particulier l'absence d'inhibiteur de la Taq polymérase dans le milieu de culture. CONCLUSION Le développement des toxoplasmes sur milieu cellulaire peut être détecté par la technique PCR. La version sur surnageant de culture à l'intérêt de laisser intact les cellules et de témoigner du développement réel des toxoplasmes.
Disciplines :
Laboratory medicine & medical technology
Immunology & infectious disease
Author, co-author :
Chetaille, Eric;  Centre Hospitalier Universitaire d'Amiens - CHU d'Amiens > Laboratoire > Parasitologie-Mycologie
Hayette, Marie-Pierre ;  Centre Hospitalier Universitaire d'Amiens - CHU d'Amiens > Laboratoire > Parasitoogie-Mycologie
Puy, H.;  Centre hospitalier universitaire Louis Mourier, Paris > Laboratoire de biochimie et biologie moléculaire,
Biendo, M.;  Centre Hospitalier Universitaire d'Amiens - CHU d'Amiens > Parasitologie-Mycologie
Carme, Bernard;  Centre Hospitalier Universitaire d'Amiens - CHU d'Amiens > Parasitologie-Mycologie
Language :
French
Title :
Faisabilité de la PCR dans la détection du développement de Toxoplasma gondii en culture cellulaire MRC5.
Alternative titles :
[en] PCR faisability for the detection of Toxoplasma gondii development in MRC5 cell cultures
Publication date :
June 1994
Event name :
Congrès de la société française de parasitologie
Event organizer :
Société française de parasitologie
Event place :
Toulouse, France
Event date :
1-2 juin 1994
Available on ORBi :
since 01 January 2011

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