Abstract :
[fr] L’utilisation d’un électrolyte non aqueux en électrophorèse capillaire (EC) a permis d’ouvrir de nouvelles perspectives dans le domaine de l’analyse des médicaments.
La séparation achirale de quatre bêta-bloquants par EC de paires d’ions en milieu non aqueux a d’abord été étudiée en utilisant le camphosulfonate comme agent d’appariement d’ions. L’influence sur la résolution de paramètres tels que la nature et la concentration du contre-ion de même que des constituants ioniques de l’électrolyte a été évaluée au moyen d’une approche univariée. La méthodologie des plans d’expériences a ensuite été appliquée afin de révéler les possibles interactions et les éventuels effets quadratiques. Enfin, les conditions optimales obtenues par les approches univariée et multivariée ont été comparées.
Dans un deuxième temps, la séparation énantiomérique de substances médicamenteuses basiques a été réalisée au moyen d’une association originale en EC en milieu non aqueux, à savoir un agent d’appariement d’ions avec une cyclodextrine (CD). L’association, dans du méthanol, de (+)-S-camphosulfonate ou d’un alcanesulfonate et d’un dérivé anionique de la bêta-CD, en l’occurrence l’heptakis(2,3-di-O-méthyl-6-O-sulfo)-bêta-CD (HDMS-bêta-CD), a conduit, dans tous les cas, à une résolution énantiomérique soit partielle, soit complète. Après une étude, effectuée de façon univariée, de l’influence de la nature et de la concentration du contre-ion et de la CD anionique, la méthodologie des plans d’expériences a été appliquée afin d’élucider les effets de l’utilisation simultanée de ces deux additifs sur la résolution énantiomérique. Une stratégie d’optimisation rapide des conditions expérimentales a également été développée.
L’influence de la nature des composants cationique et anionique de l’électrolyte non aqueux sur la résolution énantiomérique d’analytes basiques en présence de différentes concentrations de HDMS-bêta-CD a ensuite été évaluée. Bien que l’impact de ces deux constituants soit significatif, c’est le composant cationique qui paraît influencer le plus fortement l’énantioséparation.
Finalement, l’EC en milieu non aqueux a été appliquée avec succès à la séparation et au dosage des énantiomères du salbutamol dans l’urine au moyen de l’heptakis(2,3-di-O-acétyl-6-O-sulfo)-bêta-CD. La technique d’extraction en phase solide a été sélectionnée pour traiter les échantillons urinaires avant leur analyse par EC. La méthode de dosage a été entièrement validée selon une nouvelle approche faisant appel aux profils d’exactitude sur une gamme de concentrations allant de 375 à 7500 ng/ml pour chaque énantiomère.
[en] The use of nonaqueous electrolyte solutions in capillary electrophoresis (CE) has made it possible to open up new horizons in the field of drug analysis.
The achiral separation of four beta-blockers was first investigated in nonaqueous CE (NACE) using the principle of ion-pair formation. Camphorsulfonate was selected as the counter-ion. The influence on resolution of parameters such as the nature and concentration of the counter-ion and the ionic components of the background electrolyte was studied by means of a univariate approach. Experimental designs were then applied to estimate possible quadratic effects and first-order interactions. Finally, the optimal conditions obtained by the univariate and the multivariate approaches were compared.
The enantiomeric separation of basic pharmaceuticals was then investigated using an original combination in NACE, namely an ion-pairing reagent together with a cyclodextrin (CD). The simultaneous addition to the methanolic background electrolyte of (+)-S-camphorsulfonate or an alkanesulfonate and an anionic beta-CD derivative, namely heptakis(2,3-di-O-methyl-6-O-sulfo)-beta-CD (HDMS-beta-CD), led to partial or complete enantioresolution in all cases. The influence on the enantioseparation of the nature and concentration of the counter-ion and the anionic CD derivative was studied by means of a univariate approach. In order to understand the effects on the enantiomeric resolution of the simultaneous use of camphorsulfonate and HDMS-b-CD, experimental designs were applied. A fast method development strategy was finally recommended for the enantioseparation of basic drug compounds.
The influence on the enantiomeric resolution of the nature of the cationic and anionic background electrolyte components was also studied in the presence of several HDMS-beta-CD concentrations. Both cationic and anionic background electrolyte components were found to have a deep impact on the enantioseparation but it is the cationic component that seems to have the strongest influence.
Finally, NACE was successfully applied to the resolution and the determination of salbutamol enantiomers in urine samples using heptakis(2,3-di-O-acetyl-6-O-sulfo)-beta-CD. Solid phase extraction was used for sample clean-up prior to the CE separation. The method was then fully validated using a new approach based on accuracy profiles over a concentration range from 375 to 7500 ng/ml for each enantiomer.
