Développement d’un CAR-NK et évaluation de thérapies ciblées anti-CD123 pour la prise en charge d’hémopathies impliquant les cellules dendritiques plasmocytoïdes

<jats:p xml:lang="fr">Les leucémies à des cellules dendritiques plasmocytoïdes (LpDC) ainsi que les leucémies aigües myéloïdes avec excès de cellules dendritiques plasmocytoïdes (LAM-pDC), sont des entités récemment décrites qui ont en commun la prolifération excessive de cellules dendritiques plasmocytoïdes (pDC). Ces pDC sont caractérisés par une surexpression de l’antigène CD123 dans 100% des cas, ce qui en fait une cible thérapeutique de choix. En effet, le pronostic de ces hémopathies est très défavorable il n’existe actuellement aucun consensus thérapeutique. Grâce au réseau français de LpDC, nous avons étudié l’efficacité de deux thérapies ciblées et développé une immunothérapie anti-CD123 dans le traitement de ces hémopathies à pDC.Dans cette étude, nous avons tout d’abord évalué le tagraxofusp, une thérapie ciblée déjà approuvée pour la LpDC, dans le traitement de la LAM-pDC. En comparaison à la LpDC, la LAM-pDC se caractérise par la présence d’une composante blastique en plus des pDC. Nous avons montré que le tagraxofusp élimine de façon significative les pDC et, dans une moindre mesure, les blastes. Nos données indiquent que cette différence de sensibilité s’explique par une plus faible expression de CD123 et de son corécepteur CD131 à la surface des blastes comparativement aux pDC. Nous avons également observé une forte expression de BCL-2 sur les blastes, et la combinaison avec le venetoclax s’est avérée être efficace pour éradiquer à la fois les blastes et les pDC au sein de nos expériences réalisées à partir d’échantillons de patients atteints de LAM-pDC.Nous avons également confirmé l’efficacité du pivekimab sunirine (PVEK), un anticorps anti-CD123 conjugué à une chimiothérapie, pour le traitement des LpDC, à la fois in vitro et in vivo. Ces données ont permis de démontrer, pour la première fois, la réponse spatiale de ce traitement in vivo. Nous avons également établi un modèle de LpDC résistants au PVEK qui nous a permis de montrer une diminution de l’antigène cible CD123, ainsi qu’une augmentation des transporteurs ABCB1. Grâce à ces mécanismes, la cellule peut se rendre invisible au traitement et relarguer la drogue à l’extérieur de la cellule.De plus, ces travaux ont permis de développer une immunothérapie anti-CD123 de type CAR-NK. En effet, cette nouvelle immunothérapie basée sur la modification génétique des cellules natural killer (NK) pour l’expression d’un antigène chimérique (CAR), a été évaluée dans le traitement de la LpDC. Nous avons d’abord établi un protocole de production des CAR-NK à partir de la lignée NK-92, puis à partir de NK primaires issus de sang périphérique et de sang placentaire. Ces CAR-NK se sont révélées cytotoxiques et fonctionnelles face aux lignées de LpDC. Nous avons également initié le développement d’une nouvelle construction de CAR-CD123, de quatrième génération qui permettra la sécrétion constitutive de l’IL-21.En conclusion, notre étude a permis le développement d’une immunothérapie innovante ainsi que l’évaluation de stratégies thérapeutiques prometteuses pour la prise en charge des hémopathies à pDC, en offrant de nouvelles perspectives quant à l’optimisation des associations thérapeutiques.