Abstract :
[fr] Les surdités neurosensorielles touchent de nombreuses personnes à travers le monde. Cessurdités sont à l’heure actuelle irréversibles chez le mammifère car caractérisées par uneabsence de régénération des cellules ciliées de l’organe de Corti et des neurones qui lesinnervent. Le développement de la cochlée est un phénomène complexe qui implique lacoordination de nombreux gènes. La compréhension des mécanismes qui sous-tendent ledéveloppement de l’oreille interne, nous paraît essentielle pour la mise au point de nouvellesstratégies permettant, à terme, d’induire la régénération ou la réparation des cellules del’organe de Corti. Les connaissances actuelles nous permettent en effet de constater que denombreuses molécules qui contrôlent l’organogenèse sont souvent activées ou impliquéesdans les phénomènes de régénération tissulaire après un traumatisme, y compris à l’échelle del’oreille interne (Levic et al., 2007).Ces dernières années une classe d’ARNs non codant, les microARNs (miARNs), a émergé parla découverte de leurs fonctions notamment au cours du développement de nombreux organes.Ces petits ARNs constituent une classe de petits ARNs endogènes de 21-24 bases quis’apparient avec l’extrémité 3’ d’un ou plusieurs ARNm cible dont ils sont partiellementcomplémentaires. Cette hybridation réprime la traduction de la protéine correspondante. LesmiARNs peuvent ainsi agir sur de nombreux phénomènes par l’intermédiaire de leur actionsur des centaines de cibles différentes. C’est pourquoi nous avons axé notre travail sur le rôleque pourraient avoir ces petits ARN non codants sur le développement cochléaire.Lors de notre étude, nous avons caractérisé le patron d’expression des miARNs au cours dudéveloppement otique et avons mis en évidence un rôle primordial des miARNs tout au longde ce phénomène, notamment par l’utilisation d’une souris invalidée pour Dicer, une enzymeessentielle à la biogenèse des miARNs. Nous avons mis en évidence l’expression dynamiquede deux familles de miARNs, les familles miR-183 et miR-200 au cours du développement etde la différenciation des cellules de l’organe de Corti, qui concorderait avec un possible rôlede ces miARNs dans le déterminisme du destin cellulaire. L’étude de la souris invalidée pourDicer (Dicer-cKO) a révélé de nombreux défauts développementaux en l’absence de miARNscaractérisés notamment par une morphogenèse et une neurogenèse altérée. Aux stadesprécoces (E11), une apoptose massive est observée au sein de la vésicule otique et duganglion cochléo-vestibulaire, accompagnée d’une augmentation des taux de pH2AX,marqueur des cassures double brin à l’ADN, mais également de p53, PUMA et NOXA, deuxcibles pro-apoptotiques en aval de p53. Ces observations suggèrent que les cellules subissentdes dommages à l’ADN lors de l’invalidation de Dicer par des mécanismes non encoreclairement élucidés à ce jour et que ces dommages à l’ADN impliquent l’induction d’uneapoptose à la fois dépendante et indépendante de p53. Cela a été confirmé par la restaurationpartielle du phénotype apoptotique en l’absence de p53 concomitamment à Dicer .Nous avonségalement mis en évidence une augmentation du nombre de progéniteurs exprimant Sox2 etJagged1chez la souris Dicer-cKO, accompagnée d’une prolifération persistante au sein del’épithélium cochléaire à des stades avancés du développement. Plus tard, la différenciationen cellules ciliées et de soutien sera fortement perturbée. Alors que les cellules ciliéesexpriment le marqueur de différenciation Myo6, elles forment des rangées de cellulessurnuméraires au sein d’un conduit cochléaire tronqué, en l’absence de Dicer. En ce quiconcerne les cellules de soutien, celles-ci sont présentes sous les cellules ciliées mais nepeuvent se différencier complètement et exprimer les marqueurs de différenciation p27kip1,Prox1 et p75. Pour tenter d’expliquer ces défauts, nous avons initié la caractérisation descibles des miARNs exprimés au sein de la cochlée, et mis en évidence une interaction directeentre miR-183 et l’intégrine alpha 3 (ITGA3). Les intégrines sont des molécules d’adhésion àla matrice extracellulaire déjà caractérisées comme intervenant au cours de l’apoptose, laprogression du cycle cellulaire, la morphogenèse et la différenciation (Brunetta et al., 2012;Carrano and Pagano, 2001; Lewis et al., 2002; Pu and Streuli, 2002). Une surexpression isoléede cette molécule en l’absence des miARNs pourrait expliquer certains défauts observés chezla souris Dicer-cKO. Valider l’interaction des miARNs avec d’autres acteurs dudéveloppement otique comme le récepteur Notch et ses ligands notamment, est une desperspectives de notre travail.
