Contribution to the study of restoring female fertility using a xenograft model of cropreserved ovarian tissue

Le pronostic des cancers s’améliorant constamment, de plus en plus de jeunes adultes doivent faire face aux séquelles des traitements anticancéreux, parmi lesquelles la difficulté de concevoir un enfant. Pour les patientes pré-pubères, souffrant de cancers hormono- dépendants ou dont la prise en charge oncologique est urgente, la cryopréservation de tissu ovarien avant l’initiation des traitements susceptibles d’affecter les gonades est actuellement la seule stratégie permettant de préserver la fertilité qui offre un espoir de conception. Toutefois, le succès de cette méthode est limité par la perte folliculaire qui survient après l’autotransplantation du tissu ovarien. Celle-ci pourrait être due à l’apoptose induite par l’hypoxie et les lésions d’ischémie-reperfusion post-transplantatoires.Les recherches menées au cours de ce travail ont été scindées en deux parties. Dans la première, nous avons déterminé une méthode d’analyse des fragments ovariens après xénogreffe permettant d’explorer de façon fiable les effets d’un traitement sur la densité folliculaire. Nous avons également confirmé l’adéquation de la souche de souris hôte utilisée dans le modèle de xénogreffe précédemment développé au laboratoire.Dans la seconde partie de ce travail, nous avons évalué l’intérêt potentiel d’un traitement anti- apoptotique sur la préservation folliculaire après greffe de tissu ovarien cryopréservé. L’effet du Z-VAD-FMK, un inhibiteur de caspases, a d’abord été étudié sur la survie de cellules de la granulosa cultivées en conditions hypoxiques. Nous avons ensuite réalisé des xénogreffes de tissu ovarien humain sur des ovaires de souris immunodéficientes. Au préalable, les fragments ont été enrobés dans une matrice de collagène supplémentée ou non avec le Z- VAD-FMK. Nos analyses ont révélé que cet anti-apoptotique ne permettait pas d’améliorer la préservation folliculaire après la greffe. Par rapport à notre condition contrôle, ce traitement n’affectait pas non plus la prolifération cellulaire, l’hypoxie tissulaire et la formation de nouveaux vaisseaux fonctionnels.En conclusion, nos travaux ont permis de développer et valider des outils techniques indispensables pour les études de xénogreffes de tissu ovarien. Toutefois, nos résultats obtenus in vivo suggèrent que l’apoptose n’est pas la cause principale de la perte folliculaire après la greffe. Ils renforcent ainsi des données récentes qui, en désignant le recrutement folliculaire massif comme étant à l’origine de ce phénomène, ouvrent la voie vers de nouvelles perspectives de recherche.