Master’s dissertation (Dissertations and theses)
Détermination du rôle de l’uPAR dans l’angiogenèse
Pollenus, Thomas
2014
 

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Keywords :
Angiogenèse; uPAR; Facteurs de croissance
Abstract :
[fr] L’angiogenèse, processus menant à la formation de nouveaux vaisseaux sanguins à partir de vaisseaux préexistants, joue un rôle majeur dans la croissance tumorale et dans la dissémination des métastases. Les cellules tumorales sécrètent plusieurs facteurs de croissance, dont le plus connu est le VEGF. Ce dernier est un puissant facteur pro-angiogène, puisqu’il intervient à chaque étape de l’angiogenèse tumorale. A ce jour, plusieurs anticorps bloquant le VEGF ont été conçus et sont utilisés dans les thérapies contre le cancer. Malheureusement, des mécanismes de résistance à ces anticorps se mettent en place et restaurent la vascularisation tumorale. C’est pourquoi il est important de comprendre le mécanisme d’action du VEGF, afin d’imaginer une thérapie qui ne provoque pas ces résistances. Dans notre laboratoire, nous nous intéressons également au rôle du récepteur de l’urokinase (uPAR) dans l’angiogenèse. En effet, récemment, nous avons montré par Proximity Ligation Assay (PLA) et par co-immunoprécipitation que le VEGF induit la formation du complexe VEGFR2/uPAR à la surface des cellules endothéliales. Nous avons ensuite montré, à l’aide de siARN ciblant l’uPAR, que le VEGF requiert l’uPAR pour induire la migration, la prolifération, et la perméabilité des cellules endothéliales. L’objectif de notre mémoire est de déterminer si le rôle de l’uPAR est spécifique à la signalisation et aux effets du VEGFR2. Dans le cadre de la thérapie contre le cancer, de nombreuses études ont observé que bloquer la voie du VEGF induit des résistances tumorales dont la surexpression d’autres facteurs de croissance (comme le bFGF et l’EGF). Si l’uPAR joue également un rôle dans les voies de ces facteurs de croissance, il constituerait une cible idéale pour lutter contre la croissance tumorale. Premièrement, nous avons observé par PLA et par co-immunoprécipitation que le bFGF et l’EGF induisent respectivement un complexe uPAR/FGFR1 et uPAR/EGFR à la surface des cellules endothéliales. De plus, nous avons montré que dans les cellules transfectées avec des siARN ciblant l’uPAR, le bFGF et l’EGF ne sont plus capables d’induire la prolifération, la migration, la survie, ainsi que d’activer la voie des MAPK. Nous nous sommes ensuite intéressés à la localisation membranaire des différents récepteurs. En effet, l’uPAR, en tant que protéine ancrée dans la membrane par un lien GPI, se trouve principalement dans les lipid rafts, contrairement au VEGFR2 et au FGFR1. Lorsque les cellules sont stimulées avec les différents facteurs de croissance, nous avons montré en isolant les rafts par ultracentrifugation sur gradient de sucrose et par co-localisation avec la toxine B du choléra (marqueur des lipid rafts) que le VEGFR2 et le FGFR1 se déplacent au niveau de ces microdomaines. De plus, lorsque ces lipid rafts sont détruits par un traitement à la methyl-bêta-cyclodextrine (MβCD), le VEGF, le bFGF et l’EGF ne sont plus capables d’induire la phosphorylation des MAPK. Un traitement à la MβCD empêche également l’interaction de l’uPAR avec le VEGFR2 et le FGFR1. Nous avons alors émis l’hypothèse que l’uPAR pouvait jouer un rôle dans le recrutement de ces récepteurs au niveau des lipid rafts.
Disciplines :
Biochemistry, biophysics & molecular biology
Author, co-author :
Pollenus, Thomas ;  Université de Liège > Département des sciences de la vie > GIGA-R : Biologie et génétique moléculaire
Language :
French
Title :
Détermination du rôle de l’uPAR dans l’angiogenèse
Defense date :
26 June 2014
Institution :
ULiège - Université de Liège
Degree :
Master en Biochimie et biologie moléculaire et cellulaire, à finalité approfondie
Promotor :
Struman, Ingrid  ;  Université de Liège - ULiège > Département des sciences de la vie
Available on ORBi :
since 16 June 2017

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