Análisis filogenético de aislamientos argentinos del virus de la leucosis bovina

ANÁLISIS FILOGENETICO DE AISLAMIENTOS ARGENTINOS DEL VIRUS DE LA LEUCOSIS BOVINA
Rodríguez S.M., Trono K., Jones L.R.

INTRODUCCION
El virus de la leucosis bovina (Bovine Leukemia Virus, BLV) es un retrovirus oncogénico B-linfocitotrópico que, junto con los virus responsables de la leucemia de células T de los humanos (Human T-Cell Lymphotropic Virus, HTLV) y su contraparte en los simios (Simian T-Lymhotropic Virus, STLV), están incluidos en el género Deltaretrovirus dentro de la familia Retroviridae. BLV es un retrovirus ampliamente distribuido entre la población bovina a nivel mundial y es el agente etiológico de la leucosis bovina enzoótica (LBE), una enfermedad crónica linfoproliferativa de ocurrencia natural en el ganado bovino que constituye la enfermedad neoplásica más frecuente del ganado bovino lechero.
El estudio de la diversidad genética y la comparación de aislamientos de BLV de diferentes orígenes ha sido abordado por otros autores. Sin embargo, poco se conoce acerca de la diversidad genética en aislamientos argentinos de BLV (Vet. Microbiol. 96(1):17-23; Arch.Virol.150(3):443-458). El gen env ha sido utilizado en el estudio de relaciones filogenéticas para este virus. Una gran cantidad de secuencias de este gen, correspondientes a aislamientos de BLV de distintas áreas del mundo, se encuentran disponibles en las bases de datos públicas.

OBJETIVOS
Estudiar la diversidad genética y las relaciones filogenéticas de los aislamientos argentinos de BLV en relación con aislamientos de otras regiones del mundo.

MATERIALES Y METODOS
Se utilizaron muestras clínicas provenientes de 28 bovinos adultos naturalmente infectados con BLV provenientes de distintas zonas geográficas del país como material de partida. Se diseñaron primers y se optimizaron las condiciones de una Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) para la amplificación de la totalidad de la región genómica codificante para el gen env de provirus de BLV. La extracción del DNA genómico proviral se realizó a partir de tejido tumoral y de sangre entera en los casos de animales infectados sin evidencias clínicas. Los productos de PCR obtenidos fueron purificados y secuenciados directamente. La matriz de datos fue construida incluyendo las secuencias de BLV reportadas en este trabajo y secuencias correspondientes a cepas representativas de diversas regiones geográficas. Se incorporaron en el análisis secuencias homólogas de virus relacionados, las cuales fueron utilizadas como outgroup. Las secuencias fueron alineadas mediante el programa Muscle y analizadas mediante las rutinas de Parsimonia del programa TNT. Con el fin de evaluar el soporte de los grupos identificados se llevaron a cabo análisis de Bootstrap y Jackknife.

CONCLUSIONES
El estudio de caracterización molecular reveló una relativa estabilidad genética para los aislamientos argentinos de BLV, apoyando el hecho de que la variación genética de estos virus complejos del grupo es menor que la de otros géneros de la familia de los retrovirus. Por otra parte, del análisis filogenético se desprende el hecho de la existencia de un agrupamiento de aislamientos representativos de la región que conforman un clado único. No se observaron clados exclusivos de regiones geográficas dentro de Argentina.